四环素类***作为人畜共用的广谱性***,在世界范围内使用量大,且人畜服用四环素类药 物后大部分以原形药 物排出,随着粪便或其他途径(如污泥、废水等)进入环境,在环境中产生大量残留。污染物对小麦种子的萌发和根、芽生长的影响被认为是直观、有效的生态毒理效应指标。目前四环素类***对植物的毒理效应研究多集中于对水生植物的影响上,对于陆地作物研究较少。
本研究以冬小麦为材料,研究四环素和土霉素在水溶液和土壤(褐土)介质中对小麦种子发芽、根伸长和芽伸长抑制率的影响.通过植物发芽和根伸长受抑制的程度,确定小麦种子发芽、根伸长和芽伸长对污染物的敏感程度,探讨不同介质、不同四环素类***对小麦生态毒性的差异和污染生态指标。
1.材料与方法
1.1材料
盐酸四环素和盐酸土霉素均为分析纯,供试作物为小麦,采购后通过H2O2浸泡消毒后使用。
供试土壤采自森林公园的0~20cm 表层褐土,pH值为6.23,有机质含量为3.860%,总氮含量为0.140%,CEC含量为19.88cmol/kg。
1.2试验方法
1.2.1预备试验 水培试验:在直径9cm 的玻璃培养皿中放一层滤纸,加入不同浓度的5mL ***溶液,其中土霉素的浓度为150mg/U(高于此浓度不能在水中溶解),将小麦种子均匀放于培养皿中,保持种子胚根末端与生长方向呈直线盖好玻璃培养皿,置于25C恒温培养箱中暗处培养48h。
土培试验:称取50g风干士壤于直径9cm的玻璃培养皿中,将以几何级数配制的***溶液均匀地加入到培养皿中。由于高浓度土霉素难溶于水,因此直接将其先与少量土壤混合,通过逐次递增土壤、多次混合的方法以达到均匀染毒的效果,调节土壤含水量至持水量的60%,将所有样品置于恒温培养箱中,25C 下平衡48h。
对照种子发芽率大于90%、根伸长20mm时,预备试验结束。确定根伸长抑制浓度(IC) 达到0~60%抑制率的区间后,开始正式试验。
1.2.2正式试验
根据预备试验结果,在IC 达到抑制率0~60%时,设置至少6种不同处理浓度,其中由于高浓度上霉素在水溶液中的难溶性,在水溶液中*设置5个浓度梯度,每个处理为15粒种子,设3个平行。在与预备试验相同的温度、水分等条件下,进行种子发芽与根伸长培养试验,试验结束时,测定各处理浓度的种子发芽、根伸长长度平均值、芽伸长度平均值及标准偏差,并以浓度-抑制率绘制曲线进行回归分析。
1.3数据处理
试验结果由SPSS13.0进行模型拟合,计算出***的根伸长10%抑制浓度(IC10)和50%抑制浓度(IC50)。
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